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原代破骨細胞前體細胞轉染操作步驟在已經發表文章中的經驗分享介紹

西部戰區總醫院藥學部，在2021年發表文章到Cell Communication and Signaling的學術期刊中科研者使用美國invigentech轉染試劑，高效率轉染原代破骨細胞前體細胞（Osteoclast precursor cells），具體轉染原代破骨細胞前體細胞方法經驗如下：（注意：本文轉染實驗中使用的細胞數量、試劑用量和操作方法不適用于傳統lipo3000轉染試劑或類似產品）。

Cell culture

Sorted primary CD115(+) precursors were cultured in α-minimal essential medium (MEM) containing 10% FBS,1% penicillin-streptomycin solution and 50 ng ml? 1 colony stimulating factor (M-CSF, Abcam). After 3 days,the medium was replaced with fresh medium. LA was added at a concentration of 100 μg/ml to stimulate the precursors. To inhibit the expression of Cadherin-11, the primary osteoclast precursors were transfected with Cadherin-11 siRNA using INVI DNA RNA Transfection reagent (Invigentech) for 24 h. The sequence of Cadherin-11 siRNA was CCAATGGACCAAGATTTAT. In some experiments, primary cells were treated with BYL719 (2.5 μM), GSK690693 (25 nM), 666–15 (50 nM), rapamycin (20 μM), or AMG-487 (30 μM).

Invigentech.英克: 簡介

美國 Invigentech（英克）公司是開發用于細胞培養的胎牛血清、細胞活力檢測、細胞篩選、細胞支原體清除、細胞轉染和組織再生的新型血清替代品；提供inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品用于支持廣泛的細胞擴增和生產，包括培養間充質干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養規模生產服務；INVI DNA  RNA Transfection Reagent為原代細胞、懸浮細胞、小動物活體轉染提供高品質轉染試劑；此外我們引進的新設施可生產高純度注射用水和生物處理解決方案，用于滿足任何細胞、科研和企業客戶需求，每個批次胎牛血清、細胞活力檢測、細胞篩選細胞，轉染等產品質量的穩定性，以加速安全有效的基于細胞和組織的治療研究、開發和商業化。